病毒虽然很小,总有一种方法能提取出来

知乎日报 谭大毛 228℃ 评论

病毒虽然很小,总有一种方法能提取出来

图片:NIAID / CC BY

怎样提取那么小的病毒?

谭大毛,H6N6

我想题主的问题大概是“病毒那么小,要如何从一大坨样品里获得纯的病毒样品?”

可以大致分解为下面方面:

一般情况下,我们从样品中分离病毒,并不使用物理的“筛”或“浓缩”的办法,请参考此问题 实验室是如何分离生物病毒的? 下的回答

简单的说就是先通过各种手段圈定样品中可能含有病毒种类的范围;

再用相应的细胞去培养;

然后再收获培养物里的病毒。

当培养物里有杂质,如细胞碎片或细菌等,可利用病毒极小的特性,将培养物中的大体积物质筛掉,实验室操作中我们一般采用 0.22μm 的滤器。

但有的时候,通过在细胞上繁殖病毒,也获取不了我们需要的浓度的病毒,那么就可以采用物理的方法来进一步浓缩病毒。

比如超滤法(这也是最接近题主问题中“筛”这一概念的方法)

超滤法的关键是超滤膜,可以简单理解为孔径极小的筛子。

当含有病毒的溶液通过超滤膜时,病毒就被留在了筛子上,而溶质和小分子物质如各种无机盐等就被滤过了,之后再拿一定体积的液体把病毒从筛子上溶解下来,就实现了浓缩。

这是实验室常用的一种 超滤管,可用来滤 100Kda 以上的蛋白质或者病毒等。


超滤法的局限在于:

1. 浓缩倍数有限,一般能浓缩 20 倍到 50 倍;

2. 当滤液中还含有其它尺寸大于滤膜孔径的杂质时,会和病毒一起留在滤膜上。

所以当对浓缩倍数要求更高,或者要求获取的浓缩病毒大分子杂质含量很低时,就可以选择超离法 超速离心 了。

超速离心简单说,就是利用变态的重力把含病毒溶液里的病毒甩下来。

在病毒纯化时,我们常用的方法是密度梯度离心法。

借用来源于网络的图来说明一下 http://refer.biovip.com/doc-view-1071.html

虽然该图是讲分离细胞器的,但原理是一样的

首先,在离心管中按浓度低至高配置离心介质,如图左所示的蔗糖:

然后放到变态离心机里高速甩俩小时候,要分离的样品里的物质就按密度排列在离心管里了。这时再按密度取出需要的条带并重新溶解就好了。

啊 又是一个写了很长却注定不会有几个赞的答案呢 T-T

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